产品货号:
ME0006
中文名称:
小RNA活体组织转染试剂盒
英文名称:
LiFect-II Small RNA Invivo Transfection Kit
产品规格:
3T(小鼠,20g)|12T(小鼠,20g)|6T(Wistar大鼠,80g)|12T(Wistar大鼠,80g)
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本试剂盒专门用于小核酸活体动物体内脏器转染。LiFect-II可用来转染siRNA、antisense RNA、microRNA等200bp以内的小分子RNA和DNA,目标转染脏器主要是肝脏,也可以是肺脏和骨髓。LiFect-II使用简便,只需将sRNA与LiFect-II充分混合,再经尾静脉注射入动物体内即可。LiFect-II不仅可以活体转染小鼠,还可以活体转染大鼠、兔子、狗和猴子等。
- 优异的活体动物体内脏器小核酸转染效率:以LiFect-II包裹ApoB siRNA,可抑制小鼠肝脏90%以上的ApoB mRNA表达,抑制兔子肝脏80%以上的ApoB mRNA表达。
- 真正的活体动物体内脏器转染试剂:只需尾静脉注射,LiFect-II便可将包裹的小核酸转运到靶脏器,并转染靶细胞,再将包裹的小核酸在转染细胞内释放出来。
- 性能稳定,转染结果具有高度的可重复性。
- 使用简单,不需分离透析,不需挤压处理,不需任何特殊设备。
- 适用于体内基因功能的验证和siRNA的高通量筛选。
组分 | 3只小鼠转染 (20g/只,包裹0.12mg sRNA) | 12只小鼠转染 (20g/只,包裹0.5mg sRNA) | 6只Wistar大鼠转染 (80g/只,包裹1mg sRNA) | 12只Wistar大鼠转染 (80g/只,包裹1mg sRNA) |
试剂A | ||||
试剂B | ||||
试剂C | ||||
试剂D |
保存:-20℃,避光,避免反复冻融,有效期1年。
- 试剂A保存在-20℃,试剂B,C和D置于4℃。
- 不要将试剂A从原来的瓶子中分装出来。
- 盖子盖紧,以尽量减少体积的任何损失,这可能会改变浓度,影响配方的效果。
- 请按标签上印刷的失效日期前使用。
- 本试剂盒仅用于研究使用。
- 使用时请严格按照本使用手册的方法,只有严格按照本方法才能达到最优化的结果。
- 最适宜的使用剂量是2mg/kg的siRNA
- 合成的siRNA应脱盐后使用,只能使用低盐siRNA。
- 每只小鼠不要使用超过25μL的试剂A。如果需要使用多于25μL的试剂A,请与我们联系。
- 为达到最好的体内基因沉默效果,分别准备每一个动物的传递试剂,每只动物使用的siRNA应该<100μg。
提示:
① 按下面的步骤,制备一个小鼠的样品。每只小鼠分别准备试剂,但注射的时候可以一起注射,以减少损失。
② 所有试剂使用前预热到室温。
- 计算siRNA需要的剂量:例如:小鼠20g,使用2mg/kg的剂量,需要40μg的siRNA。
- 将一只小鼠需要的siRNA量溶于试剂C,溶解后的siRNA溶液总体积应为75μL。
注:不管使用siRNA的量是多少,siRNA溶解后,每只实验小鼠需要的siRNA溶液总体积应为75μL。 - 在另一个离心管里,加入试剂A。每10μg的siRNA,加1.5μL试剂A。然后加入试剂B,使其总体积达到20μL。
注:不管siRNA用量,保持每只实验小鼠的A+B溶液总体积为20μL。 - 将稀释过的siRNA(步骤2)加入准备好的试剂A+B中(步骤3),轻弹管壁10次,立即混匀(不要用移液器混匀)。此时,应观察到清凉的液体变浑浊。
- 混合液在室温静置2分钟,然后加入120μL试剂D,并立即弹管壁10次混匀(注:每只小鼠总注射量为200μL),即可以进行动物尾静脉注射(注:此时制备的试剂非常稳定,在室温下能放置超过2小时)。可以利用这段时间,准备其他动物的试剂。
- 将每组动物准备好的试剂(步骤5)混合在一起,尾静脉非常缓慢地注射,每只小鼠0.2mL。注射前动物尾静脉应加热,扩张血管。
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